RCMW 灌流细胞培养RCMW 自动更换培养液
细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,灌流细胞培养RCMW,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
其他实验
细胞程度:软琼脂实验
细胞屏障:跨膜电阻、荧光黄透过率
细胞粘附实验
共培养实验
裸鼠成瘤实验
细胞培养的目的究竟是什么?
1.1 研究开发,如新药筛选,疫1苗、基因工程、细胞工程研究与开发、单抗1体制备等。
1.2 基础研究,如作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。
2 生物制药,疫1苗生产:如病毒性疫1苗(肝2炎病毒疫1苗、艾1滋病疫1苗等),3D灌注式RCMW,多肽疫1苗(肿1瘤疫1苗)等。
2.2 基因工程生产:如EPO等。
2.3 抗1体、基因治1疗生产。
2.4 细胞工程生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
2.5 利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的和替代体内法检测其成品的生物活性。
培养容器应该以什么速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器转动时,细胞聚合体加速,直到他们到达沉积速度,而该速度取决于细胞聚合体的大小。根据斯托克斯方程,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,RCMW,随着聚合体体积上的增加,灌注细胞培养RCMW,它们沉降的更迅速,同时为了防止细胞聚合体与培养壁的碰撞有必要增加旋转速度。因此,一开始可能以慢速旋转培养,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。
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